La plateforme apporte son expertise aux personnels de l’IMRB et aux utilisateurs extérieurs pour l’histologie et la microscopie. La plateforme d’imagerie est certifiée ISO 9001 depuis avril 2014. Cette certification garantie le suivi de règles de management de la qualité. La plateforme fournit le matériel depuis la préparation des échantillons jusqu’à l’observation en microscopie.
La plateforme se compose en 2 plateaux :
La plateforme met en œuvre un ensemble d’équipements permettant :
a) la préparation pour la microscopie optique
b) la préparation pour la microscopie électronique
a) Préparation pour la miscroscopie optique
La plateforme fournit un service allant de la préparation de l’échantillon à la coupe et des équipements pour la coupe en paraffine ou en congélation et pour l’immunohistochimie.
La coloration se fait avec un automate ThermoScientific Gemini AS.
Colorations proposées :
Hémalun de Mayer/ésosine : les noyaux sont visibles en violet et le cytoplasme en rose
Rouge Sirius : le cytoplasme est jaune, les fibres de collagènes apparaissent en rouge
Le personnel du plateau histologie peut assister pour la mise au point de protocoles d’immunohistochimie.
Un automate d’Immunohistochimie Epredia Autostainer 360 et son PT Module sont utilisables pour automatiser les immuno-histo-chimie. Ces matériels sont utilisables après formation par les personnels du plateau d’histologie.
Le personnel de la plateforme met à disposition un cryo-microtome Leica CM3050S et un microtome Shandon Finesse 325. Le cryo-microtome Leica CM3050S permet des coupes à congélation jusqu’à -40 °C pour une épaisseur de 5 à 100 µm. Le microtome permet des coupes en paraffine de 3 à 30 µm. Le microtome est accompagné d’une plaque froide Histostar afin de refroidir et durcir les blocs et d’une plaque chauffante afin de lisser les coupes.
Ces équipements sont accessibles après formation par le personnel de la plateforme et la réservation se fait sur : https://imrb.inserm.fr/espace-reservation/
b) Préparation pour la microscopie électronique
La plateforme réalise aussi l’ensemble des opérations pour l’obtention de grilles en microscopie électronique en transmission.
Le plateau de microscopie optique est dédié à l’acquisition en microscopie de préparations histologiques ou fluorescentes. Ils sont utilisables uniquement après formations par la plateforme et la réservation se fait sur : https://imrb.inserm.fr/espace-reservation/
Plusieurs microscopes sont disponibles :
a) Microscope Axioplan 2 :
Ce microscope est dédié à l’acquisition en “lumière blanche” pour l’histologie. Il est équipé d’une caméra Zeiss MRc pour l’obtention d’image couleur et d’une série d’objectif (Plan-NeoFluar x5/0,16 ; Acroplan x10/0,25 ; x20/0,45. Plan-Neofluar x40/0,75 ; x63/1,25 huile) pour un large choix de grandissement. Les acquisitions se font avec le logiciel Zeiss Zen 2012.
b) Microscope AxioImager M2 :
L’AxioImager M2 est dédié à la microscopie en fluorescence. Il est doté de 4 cubes pour la fluorescence (DAPI, A488/FITC, A547/TRITC, To-Pro3/Cy5) couvrant les molécules fluorescentes les plus utilisées en recherche biologique. Les images sont obtenues par la caméra monochrome Zeiss MRm. Les objectifs sont : Acroplan x10/0,25 ; x20/0,45 ; Plan-Neofluar x40/0,75. Le logiciel Zen 2012 pilote le microscope et la caméra.
c) Microscope confocal LSM 900 Airyscan 2 :
Le confocal est installé sur un microscope inversé Zeiss Axio Observer 7. Il est équipé d’une platine motorisée et d’une chambre thermostatée. Les diodes LASER (405 nm, 488 nm, 561 nm, 638 nm) permettent de couvrir un large éventail de molécules fluorescentes utilisées en biologie. Ce système permet l’étude de distribution de marqueurs fluorescents, de colocalisation, l’analyse spectrale (séparation des spectres de fluorescence) et des applications en cellules vivantes (vidéo-microscopie, FRAP) ainsi qu’une approche pour la super-résolution.
d) Microscope inversé AxioVert A1 :
Le microscope inversé est dédié à l’aquisition en phase et en couleur de cellules sur plusieurs types de support. Il est équipé d’une caméra Zeiss Axiocam 105 couleur et d’une série d’objectif à longue distance de travail (LD A-Plan 5x/0.15 Ph1, LD A-Plan 10x/0.25 Ph1, LD A-Plan 20x/0.35 Ph1, LD A-Plan 40x/0.55 Ph1). Les acquisitions se font avec le logiciel Zeiss Zen 2012.
e) Scanner de lames Axioscan 7 :
Le scanner de lames permet de numériser aussi bien les coupes en lumière blanche, en lumière polarisée ou en fluorescence. Il est équipé d’objectifs Plan-Apochromat 10x/0,4, 20x/0.8 et 40x/0,95 et des cubes pour la fluorescence permettant de couvrir un large spectre de molécules fluorescentes ainsi qu’un polariseur circulaire et un analyseur pour la lumière polarisée.
f) Incucyte S3 :
Il s’agit d’un système d’imagerie automatisé installé dans un incubateur pour faire des enregistrements de cellules vivantes ou d’organoïdes sur de long temps. Il accepte divers types de supports allant de la flasque à la boite multi-puits.
Il est équipé pour la fluorescence et le contraste de phase.
Les documents, à destination des agents, mis à disposition par la plateforme d’imagerie se trouvent dans la bibliothèque de données de la page de la plateforme.
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La norme ISO 9001 définit une série d’exigences concernant la mise en place d’un système de management de la qualité dans un organisme, quels que soient sa taille et son secteur d’activité.
Rabhi BV, Thomasseau S, Decrouy X, Cohen-Solal M, Deckert M, Coudert AE, Brial F. The bone phenotype associated with cherubism is independent of Caspase-1-dependent inflammasome activation in the mouse.
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Int J Mol Sci. 2020 Jul 8;21(14):E4844.Amélie E.Coudert, François Redelsperger, Yasmine Chabbi-Achengli, Cécile Vernochet, Caroline Marty, XavierDecrouy, Thierry Heidmann, Marie-Christine de Vernejoul, Anne Dupressoir. Role of the captured retroviral envelope syncytin-B gene in the fusion of osteoclast and giant cell precursors and in bone resorption, analyzed ex vivo and in vivo in syncytin-B knockout mice
Bone Reports Volume 11, December 2019, 100214Degrugillier F, Simon S, Aissat A, Remus N, Mekki C, Decrouy X, Hatton A, Hinzpeter A, Hoffmann B, Sermet-Gaudelus I, Callebaut I, Fanen P, Prulière-Escabasse V. Unsolved severe chronic rhinosinusitis elucidated by extensive CFTR genotyping.
Clin Case Rep. 2019 Sep 27;7(11):2128-2134.Perla C. Reyes-Fernandez, Baptiste Periou, Xavier Decrouy, Fréderic Relaix and François Jérôme Authier. Automated image-analysis method for the quantification of fiber morphometry and fiber type population in human skeletal muscle
Skeletal Muscle, 2019, vol 9, 1-15Aubatin A, Sako N, Decrouy X, Donnadieu E, Molinier-Frenkel V, Castellano F. IL4-induced gene 1 is secreted at the immune synapse and modulates TCR activation independently of its enzymatic activity.
Eur J Immunol. 2018 Jan;48(1):106-119C. Delestrain, S. Simon, A. Aissat, R. Medina, X. Decrouy, E. Nattes, A. Tarze, B. Costes, P. Fanen and R. Epaud. Deciphering the mechanism of Q145H SFTPC mutation unmasks a splicing defect and explains the severity of the phenotype
European Journal of Human Genetics (2017) 25, 779–782Loïc Drévillon, André Megarbane, Bénédicte Demeer, Corine Matar, Paule Benit, Audrey Briand-Suleau, Virginie Bodereau, Jamal Ghoumid, Mayssa Nasser, Xavier Decrouy, Martine Doco-Fenzy, Pierre Rustin, Dominique Gaillard, Michel Goossens and Irina Giurgea, KBP–cytoskeleton interactions underlie developmental anomalies in Goldberg–Shprintzen syndrome
Hum. Mol. Genet. (2013) 22 (12): 2387-2399.Laura H. Okagaki , Anna K. Strain , Judith N. Nielsen, Caroline Charlier, Nicholas J. Baltes, Fabrice Chrétien, Joseph Heitman, Françoise Dromer, Kirsten Nielsen.
PLoS Pathog. 2010; 6:e1000953Lara Khouzami, Marie-Claude Bourin, Christo Christov, Thibaud Damy, Brigitte Escoubet, Philippe Caramelle, Magali Perier, Karim Wahbi, Christophe Meune, Catherine Pavoine, Françoise Pecker. Delayed Cardiomyopathy in Dystrophin Deficient mdx Mice Relies on Intrinsic Glutathione Resource
Am J Pathol. 2010; 177: 1356-64Shao-yu Zhang, Maud Kamal, Karine Dahan, André Pawlak, Virginie Ory, Dominique Desvaux, Vincent Audard, Marina Candelier, Fatima Ben Mohamed, Marie Matignon, Christo Christov, Xavier Decrouy, Veronique Bernard, Gilles Mangiapan, Philippe Lang, Georges Guellaën, Pierre Ronco, and Djillali Sahali. c-mip Impairs Podocyte Proximal Signaling and Induces Heavy Proteinuria
Sci. Signal., 18 May 2010, Vol. 3, Issue 122, p. ra39S Terry, G Ploussard Y Allory, N Nicolaiew, F Boissière-Michot, P Maillé, L Kheuang, E Coppolani, A Ali, F Bibeau, S Culine, R Buttyan, A de la Taille, and F Vacherot. Increased expression of class III β-tubulin in castration-resistant human prostate cancer
British Journal of Cancer (2009) 101, 951–956. doi:10.1038/sj.bjc.6605245
Tél.: 01 49 81 44 84
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